一、液體樣品 1. 將約 2 μL 液體樣品(如全血、細胞培養液、病毒樣品、糞便樣品)加入到 50 μL 免 提取核酸釋放劑中。(注意:總液體樣品用量不要超過本產品用量的 1/10。) 2. 室溫放置 3 分鐘;對于較難裂解的樣品(如有厚壁的真菌等),則保溫時間可以延長 到 10-30 分鐘。 3. 簡短振蕩混勻后取樣品裂解液直接進行 PCR 擴增或其他擴增。(注:裂解液體積最好不要超過反應體積的 1/10,對 50μL 的擴增體系,加入的裂解液不要超過5μL。由于不同的擴增體系成分不同,建議做梯度測試以確定最佳反應體系)二、組織樣品 1. 將或 2 mg 的固體樣品(如動物組織、植物葉片、種子等)加入到 50 μL 免提取核酸 釋放劑中。 (注意:總樣品量不要超過 1 mg/10 μL 的比例。) 2. 95℃加熱 5 分鐘;對于較難裂解的樣品(如石蠟組織切片、血斑等),則保溫時間可 以延長到 10-30 分鐘。 3. 簡短振蕩混勻后取樣品裂解液直接進行 PCR 擴增或其他擴增。 (注:裂解液體積最好不要超過反應體積的 1/10,對 50μL 的擴增體系,加入的裂解液不要超過 5μL。由于不同的擴增體系成分不同,建議做梯度測試以確定最佳反應體系)
1、細菌培養時間一般為 12 ~ 16 小時,如接種量大則應減少培養時間,過度培養會降低質 粒質量甚至導致質粒 DNA 突變; 2、每次使用時都要注意 Buffer S2 和 S3 是否形成沉淀,如有沉淀 37℃溶解后再用; 3、注意 Buffer S1,S2 和 S3 的用量比例,若細菌量增大,需按比例放大這些溶液的使用量; 4、質粒的產量跟細菌量、質??截悢?、質粒大小和操作規范程度密切相關,一般 1.5 ml 過夜培養菌體可收獲約 10 ug 高拷貝質粒。
1、細菌培養時間一般為 12 ~ 16 小時,如接種量大則應減少培養時間,過度培養會降低 質粒質量甚至導致質粒 DNA 突變; 2、 每次使用時都要注意 Buffer S2 和 S4 是否形成沉淀,如有沉淀 37℃溶解后再用; 3、 質粒的產量跟細菌量、質??截悢?、質粒大小和操作規范程度密切相關。
1、Buffer BL 的加入能夠改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和穩定性,消除高 溫潮濕或其他不良環境因素對吸附柱造成的影響。 2、 使用前請先檢查 Buffer BL、Buffer GN 是否出現渾濁,如有混濁現象,可在 37℃水浴 中加熱幾分鐘,即可恢復澄清。 3、 溶液 Buffer GN 含有 pH 指示劑,黃色,指示 pH≤7.5。 ? 切膠時,紫外照射時間應盡量短,以免對 DNA 造成損傷。 4、 回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關,初始量越少、洗脫體積越小,回收率越低。
1、 如 Buffer GTL 和 Buffer GL 產生沉淀,可在 56℃水浴溶解; 2、 樣品應避免反復凍融,否則會導致提取的 DNA 片段小,提取量下降; 3、 所有離心步驟均為臺式離心機,室溫下操作; 4、按要求在 Buffer W1 和 Buffer W2 中加入無水乙醇。
1、如 Buffer GTL 和 Buffer GL 產生沉淀,可在 56℃水浴溶解; 2、 樣品應避免反復凍融,否則會導致提取的 DNA 片段小,提取量下降; 3、 所有離心步驟均為臺式離心機,室溫下操作。