(注意:使用前在 BufferGP1 中加入 β-巰基乙醇,使其終濃度為 0.2%,水浴鍋中 65°C 預熱) 1. 取植物新鮮組織約 100 mg 或干組織約 30 mg,加入液氮充分研磨。 (注意:如果組織為較幼嫩部分,可不用液氮研磨,直接在研缽中加入 700 μl Buffer GP1 和組織一起研磨即可) 2. 將研磨后的粉末收集到一離心管(自備)中,加入 700 ul 65°C 預熱的 Buffer GP1 (使用前在預熱的 Buffer GP1 中加入 β-巰基乙醇,使其終濃度為 0.2%),迅速顛倒混勻或用 渦旋振蕩器充分振蕩混勻,然后將離心管置于 65°C 水浴 20 min,期間每隔 3 ~ 5 min 顛倒離心管混勻樣品一次。 (注意:如要去除 RNA,可在上述步驟完成后加入濃度為 100mg/ml 的 RNaseA 4 μl,振蕩混勻,室 溫處理 5~10min) 3. 加入 700 μl 氯仿,充分混勻,12,000 rpm 離心 5 min。 (注意:如果提取的植物材料富含多酚或淀粉,可在第 3 步驟前用酚:氯仿/1:1 進行等體積抽提)4. 小心將上層水相轉入一新的離心管(自備)中,加入 700 μl Buffer GP2,充分混勻。 將混勻后的溶液轉入離心吸附柱中,若一次不能轉移完成,可分次加入,12,000 rpm 離心 30 sec,棄收集管中廢液。 5. 向吸附柱內加入 500 μl 的 Buffer W1,室溫 12,000 rpm 離心 30 sec,棄收集管中廢 液。 (注意:Buffer W1 是濃縮液,按要求加入乙醇,用后及時蓋緊,以防乙醇揮發) 6. 向吸附柱內加入 500 μl 的 Buffer ...